纳米颗粒跟踪分析仪是一种基于纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术的物理性能测试仪器,通过追踪纳米颗粒的布朗运动和光散射特性,实现粒径、浓度及Zeta电位等多参数测量。该仪器利用激光散射视频显微镜和高灵敏度CMOS传感器,捕捉纳米颗粒在液体中的布朗运动轨迹。通过分析颗粒的扩散系数,结合斯托克斯-爱因斯坦方程,计算其流体力学直径,精度可达4nm。同时,支持荧光检测功能,可识别荧光标记颗粒,实现多参数同步分析。
一、高精度光学系统:实现单颗粒可视化
光学系统是NTA的核心,需满足“清晰观察纳米级颗粒”并“避免多重散射干扰”的需求,特点如下:
光源:窄光束、低相干性
通常采用半导体激光器(如488 nm、640 nm),输出光束经聚焦后形成极细的圆柱形激光束(直径约50-100μm),仅照亮样品池中的薄层区域(减少背景干扰和多重散射)。
低相干性光源可降低颗粒散射光的干涉效应,使单个颗粒呈现为清晰的“亮点”,便于识别和追踪。
成像物镜:高数值孔径(NA)
配备高倍显微物镜(如40×、60×),且数值孔径(NA)较高(通常0.8-1.2),以增强对纳米颗粒散射光的收集能力,确保小至10 nm的颗粒仍能被清晰成像。
物镜与激光束同轴或呈特定角度(如90°散射角),避免直射光干扰,仅接收颗粒的侧向散射光。
二、样品池:适配微量样品,减少颗粒沉降与团聚
样品池设计需满足“低体积需求”“减少颗粒运动干扰”和“便于清洁”的特点:
微量样品容量
样品池体积通常为10-200μL,适用于珍贵或低浓度样品(如生物纳米颗粒、外泌体),且可通过注射器或移液枪快速更换。
低扰动流场
池体多为石英或玻璃材质,内壁光滑,减少颗粒吸附;部分设计包含搅拌装置(如磁力搅拌子)或轻微流动系统,避免颗粒因重力沉降导致的分布不均,但需保证扰动强度不影响颗粒的布朗运动(NTA的核心测量依据)。
温控功能(可选)
部分高d型号配备温控模块(如20-40℃),可维持样品温度稳定,避免温度变化导致的液体粘度改变(粘度影响颗粒布朗运动速度,进而影响尺寸计算)。
三、成像与追踪系统:捕捉颗粒动态轨迹
该系统负责将光学信号转化为数字图像,并实时追踪单个颗粒的运动,特点如下:
高速相机:高帧率、低噪声
采用电荷耦合器件(CCD)或互补金属氧化物半导体(CMOS)相机,帧率通常为25-100帧/秒,可捕捉纳米颗粒因布朗运动产生的快速位移(颗粒越小,运动越剧烈,需更高帧率)。
低噪声传感器确保在弱散射光下(小颗粒信号弱)仍能区分颗粒与背景噪声。
同步控制模块
激光、相机与数据采集单元同步工作,确保每帧图像的时间间隔精确(如10 ms/帧),为后续计算颗粒扩散系数(进而推导尺寸)提供准确的时间基准。
四、数据处理单元:从轨迹到颗粒特性的量化
硬件上通常为连接相机的计算机,核心是专用NTA分析软件,其功能体现结构与算法的结合:
颗粒识别与轨迹追踪
软件通过图像分析算法(如阈值分割、边缘检测)识别单帧图像中的颗粒亮点,再通过多帧匹配(如基于距离和运动连续性)追踪同一颗粒在不同时间点的位置,生成运动轨迹。
统计分析与结果输出
对数百至数千个颗粒的尺寸进行统计,生成粒径分布直方图、浓度(颗粒数/体积)等结果,并可通过软件校准(如使用标准颗粒验证尺寸准确性)。
五、整体结构的集成性:兼顾操作性与稳定性
光学模块、样品池和成像系统通常集成在一个紧凑的主机内,减少外界振动和光线干扰;部分型号设计为开放式样品台,便于观察和调整。
操作界面简洁,支持自动化参数优化(如曝光时间、增益),降低人为操作误差,同时允许高级用户手动调整参数以适应复杂样品(如高浓度、多分散体系)。
